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由于树突状细胞(DC)缺乏特异性的免疫标志,长期以来主要采用阴性选择的方法,即首先选取系列标志阴性、同时HLA-DR阳性的细胞,再根据CD123和CD11c的表达将DC分为髓样DC (myeloid DC,MDC：CD123-CD1 1c+)和浆细胞样DC(plasmacytoid DC,PDC： CD123+CD1 1c-),但这样的分析方法不适宜对白血病细胞急性DC的分析,因此我们选择对识别DC更加特异的标志对DC进行研究.目的 应用流式细胞仪分别采用2组三色和四色抗体组合检测国内健康个体骨髓和外周血树突状细胞(DC)亚群计数.方法检测35例健康骨髓(男/女：23/12,中位年龄36岁,范围20～50岁)和29例健康外周血(男/女：16/13,中位年龄41岁,范围20～65岁)中Lin-HLA-DR+CD 11 chiBDCA 1+mDC和Lin-HLA-DR+ CD 123hiBDCA2+pDC的数量,并与普遍采用的三色方法确定的Lin-HLA-DR+CD11chi mDC和Lin-HLA-DR+CD123hi pDC比较.结果 三色和四色设门方法均显示,健康个体骨髓和外周血DC亚群的分布不同(P＜0.05).外周血中mDC含量较高,两种方法检测的mDC与pDC的比值分别为2.70和2.31；骨髓与外周血截然不同,骨髓中含有大量pDC,三色和四色设门方法检测的mDC与pDC的比值分别为0.90和0.71.三色和四色的流式分析方法有很好的相关性(相对计数mDC r =0.86,pDC r=0.96；绝对计数mDC r =0.95,pDC r =0.98),两种方法检测的DC亚群计数除在外周血pDC检测无明显差异外,外周血中的mDC和骨髓中mDC与pDC均明显不同(P＜ 0.001).因三色方法确定的mDC与pDC中分别存在一定比例的Lin-HLA-DR +CD 11 chiBDCA1-细胞和Lin-HLA-DR+CD123hiBDCA2dim/-细胞,故三色方法确定的值明显高于四色方法,而骨髓中这些细胞比例较高.标本来源,性别,年龄和有核细胞计数是健康人DC绝对计数的影响因素(P＜0.05).结论 四色抗体组合可以界定更加严格意义的骨髓DC亚型.骨髓和外周血的DC分布不同,外周血含有大量的mDC,而骨髓以pDC为优势群体. ; 0 |