Generation and characterization of a monoclonal antibody for the detection of Retronecine-based pyrrolizidine alkaloids and its use for the development of an immunoassay
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Generation and characterization of a monoclonal antibody for the detection of Retronecine-based pyrrolizidine alkaloids and its use for the development of an immunoassay
Im Rahmen der vorliegenden Arbeit wurde unter Verwendung eines neuartigen Immunogens und einer speziellen Screening-Strategie ein monoklonaler Antikörper gegen Retronecin, den strukturellen Grundkörper hepatotoxischer Pyrrolizidinalkaloide (PA), generiert. Der Antikörper wurde in Hinblick auf Bindungskontanten, Kreuzreaktivitäten und Stabilität in relevanten Matrices umfassend charakterisiert und seine Verwendung für die Entwicklung eines indirekt kompetitiven ELISAs zur quantitativen Analyse von Retronecin-basierten PA in Lebensmitteln (Tee und Honig) untersucht. In this work, a new monoclonal antibody for the detection of the necine base Retronecine, representing the basic structure of toxicologically relevant pyrrolizidine alkaloids (PAs), was generated by using a newly designed immunogen and a special screening strategy. The antibody was characterized regarding its kinetic binding constants, cross-reactivities as well as stability in relevant matrices. Furthermore, its use for developing an indirect competitive ELISA and therefore a quantitative method for the analysis of Retronecine-based PAs in food (tea and honey) was investigated.