Chemical investigation of the roots of Wilbrandia ebracteata Cogn. (Cucurbitaceae) led to the isolation of two new (12) and four known (36) cucurbitacins. Their structures were elucidated by NMR and MS and compared with related compounds. The in vitro cytotoxicity of isolated compounds was evaluated against RD, KB, HCT-8, and A549 cell lines showing strong activity. Fil: Lang, Karen L.. Universidade Federal de Santa Catarina; Brasil Fil: Da Rosa Guimarães, Tatiana. Universidade Federal de Santa Catarina; Brasil Fil: Rocha MacHado, Vanessa. Universidade Federal de Santa Catarina; Brasil Fil: Zimmermann, Lara A.. Universidade Federal de Santa Catarina; Brasil Fil: Silva, Izabella T.. Universidade Federal de Santa Catarina; Brasil Fil: Teixeira, Marina R.. Universidade Federal de Santa Catarina; Brasil Fil: Duran, Fernando Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Unidad de Microanálisis y Métodos Físicos en Química Orgánica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Unidad de Microanálisis y Métodos Físicos en Química Orgánica; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Orgánica; Argentina Fil: Palermo, Jorge Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Unidad de Microanálisis y Métodos Físicos en Química Orgánica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Unidad de Microanálisis y Métodos Físicos en Química Orgánica; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Orgánica; Argentina Fil: Simoes, Cláudia M. O.. Universidade Federal de Santa Catarina; Brasil Fil: Caro, Miguel S. B.. Universidade Federal de Santa Catarina; Brasil Fil: Schenkel, Eloir P.. Universidade Federal de Santa Catarina; Brasil